Ensayos Microbiológicos (ebook)

Argumento de Ensayos Microbiológicos (ebook)

El control de calidad de casi todos los productos no valdría nada si no se tienen en cuenta los parámetros microbiológicos, y no sólo en el caso usual de los alimentos y bebidas que ingerimos, sino también de los fármacos que tomamos, los cosméticos que nos ponemos, las superficies que tocamos y los envases que utilizamos, y, en algunos casos, incluso el aire que respiramos. El libro que tiene entre sus manos constituye una herramienta para que pueda realizar, de forma totalmente práctica, el muestreo, la preparación de la muestra y la realización de los ensayos microbiológicos, para así obtener unos resultados y poder compararlos con los estándares de calidad o los criterios adoptados para su evaluación. Por tanto, se trata de un material válido tanto para estudiantes de esta materia como para profesionales que trabajen en laboratorios de ensayos o análisis microbiológicos.0INTRODUCCIÓN 1. MICROBIOLOGÍA Objetivos Mapa conceptual Glosario 1.1. La microbiología como ciencia experimental y aplicada 1.2. Clasificación de los seres vivos 1.3. Definición de microorganismo 1.4. Características fundamentales de los microorganismos 1.5. Factores que afectan a los microorganismos 1.6. Algunas clasificaciones de los microorganismos 1.7. La célula procariota 1.8. Bacterias 1.9. Hongos 1.10. Otros microorganismos 1.11. Familias bacterianas de estudio más frecuente 1.11.1. Enterobacteriaceae 1.11.2.Micrococaceae 1.11.3. Vibrionaceae 1.12. Enfermedades usuales causadas por microorganismos Resumen Actividades de autoevaluación 2. El laboratorio microbiológico Objetivos Mapa conceptual Glosario 2.1. El laboratorio como lugar de trabajo 2.2. Identificación de materiales y equipos usuales 2.3. Clasificación de los agentes biológicos 2.4. Buenas prácticas de laboratorio 2.5. Laboratorio básico 2.6. Técnicas de laboratorio 2.7. Niveles de seguridad 2.8. Normas de seguridad en microbiología 2.9. Vías de infección 2.10. Higiene en el trabajo del laboratorio microbiológico 2.11. Limpieza y eliminación del material 2.12. Residuos infecciosos 2.13. Tratamiento de residuos infecciosos 2.14. Teoría microbiana de la enfermedad 2.15. Microorganismos patógenos Resumen Práctica n.º 1 Actividades de autoevaluación 3. MICROSCOPÍA Objetivos Mapa conceptual Glosario 3.1. Microscopio 3.2. Tipos de microscopios 3.3. Funcionamiento del microscopio 3.4. Características que definen a un microscopio 3.5. Aberraciones 3.6. Microscopio óptico 3.7. Normas generales de uso 3.8. Manejo de objetivos 3.9. Normas de uso utilizando el objetivo de inmersión 3.10. Mantenimiento y precauciones de uso 3.11. Microscopios electrónicos 3.12. Otros tipos de microscopios Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 2 Actividades de autoevaluación 4. PREPARACIONES MICROSCÓPICAS Objetivos Mapa conceptual Glosario 4.1. Confección de preparaciones 4.2. Preparaciones vitales 4.3. Preparación de gota pendiente 4.4. Tinción negativa 4.5. Coloraciones vitales 4.6. Tinción simple 4.7. Tinción de Gram 4.8. Tinción de Ziehl-Neelsen 4.9. Tinción de flagelos 4.10. Tinción de cápsulas 4.11. Tinción de esporas 4.12. Otras tinciones Resumen Práctica n.º 3 Actividades de autoevaluación 5. LIMPIEZA Y ESTERILIZACIÓN Objetivos Mapa conceptual Glosario 5.1. Términos de uso más frecuente 5.2. Limpieza del material de vidrio 5.2.1. Material nuevo 5.2.2. Material usado 5.3. Algunos agentes microbicidas y microbiostáticos 5.4. Factores que afectan a la esterilización y a la desinfección 5.5. Termodestrucción. 5.6. Esterilización por medio de calor seco 5.7. Esterilización por medio de calor húmedo 5.8. Esterilización por filtración 5.9. Esterilización por radiaciones 5.10. Desinfectantes químicos 5.11. Pruebas de esterilidad de los equipos de laboratorio 5.12. Evaluación de desinfectantes 5.13. Antimicrobianos 5.14. Antibióticos 5.15. Resistencia bacteriana 5.16. Patógenos resistentes 5.17. Vacunas Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 4 Actividades de autoevaluación 6. MUESTREO Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Objetivos Mapa conceptual Glosario 6.1. Muestreo 6.2. Requisitos de las muestras 6.3. Muestras líquidas 6.4. Muestras sólidas 6.5. Muestras gaseosas 6.6. Muestras superficiales 6.7. Muestreo anaerobios 6.8. Programas de los planes de toma de muestras 6.9. Muestreo de alimentos 6.9.1. Definiciones 6.9.2. Plan de dos clases 6.9.3. Plan de tres clases 6.9.4. Uso de normas MIL STD 105 E 6.10. Elección de muestras no tomadas al azar 6.11. Transporte y almacenamiento 6.12. Preparación de diluciones 6.13. Dilución de líquidos 6.14. Dilución de los sólidos pulverulentos 6.15. Dilución de otras muestras sólidas Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 5 Actividades de autoevaluación 7. MEDIOS DE CULTIVO Objetivos Mapa conceptual Glosario 7.1. Necesidades nutritivas de los microorganismos 7.2. Requerimientos energéticos 7.3. Requerimientos no energéticos 7.4. Constituyentes habituales de los medios de cultivo 7.5. Condiciones de crecimiento 7.6. Clasificación según origen 7.7. Clasificación según estado físico 7.8. Clasificación según uso 7.9. Clasificación según presentación 7.10. Medios deshidratados 7.11. Preparación de los medios de cultivo 7.12. Determinación y ajuste del pH 7.13. Control de medios preparados 7.14. Formulación de algunos medios de cultivo usuales 7.14.1. Medios no selectivos 7.14.2. Medios selectivos 7.15. Otras formas de expedición usuales Resumen Práctica n.º 6 Actividades de autoevaluación 8. TIPOS DE CULTIVOS Y TÉCNICAS DE SIEMBRA Objetivos Mapa conceptual Glosario 8.1. Cultivo de bacterias 8.2. Tipos de cultivo y sus siembras 8.3. Manejo de las muestras y toma del inóculo 8.4. Cultivos en placa 8.5. Cultivos mediante diluciones seriadas 8.6. Métodos de cultivo anaerobio 8.7. Vasijas anaerobias 8.8. Cultivo en atmósfera de CO2 8.9. Características morfológicas y de cultivo de una bacteria 8.9.1. Morfología bacteriana 8.9.2. Características de cultivo Resumen Práctica n.º 7 Actividades de autoevaluación 9. INCUBACIÓN Y CONSERVACIÓN DE CULTIVOS Objetivos Mapa conceptual Glosario 9.1. Incubación 9.2. Efecto temperatura 9.3. Efecto tiempo 9.4. Conservación de cultivos 9.5. Mantenimiento en periodos cortos 9.5.1. Refrigeración simple 9.5.2. Cultivo en agar inclinado 9.5.3. Cultivos en medio líquido 9.6. Mantenimiento en periodos largos 9.6.1. Conservación en aceite 9.6.2. Suspensiones en suero desecado 9.6.3. Congelación 9.6.4. Liofilización 9.7. Velocidad de crecimiento 9.8. Cinética de crecimiento bacteriano 9.8.1. Tasa de generación 9.6.2. Determinación de la tasa de generación Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 8 Actividades de autoevaluación 10. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS Objetivos Mapa conceptual Glosario 10.1. Análisis microbiológicos 10.2. Fases para la identificación de microorganismos 10.3. Estudios de los caracteres culturales, morfológicos y fisiológicos 10.3.1. Caracteres culturales 10.3.2. Caracteres morfológicos 10.3.3. Caracteres fisiológicos 10.4. Pruebas bioquímicas para el análisis de bacterias 10.5. Pruebas relacionadas con proteínas, aminoácidos y otros compuestos nitrogenados; así como pruebas de actividad proteolítica 10.5.1. Hidrólisis de la gelatina 10.5.2. Hidrólisis de la caseína 10.5.3. Hidrólisis del suero coagulado 10.5.4. Producción de indol a partir del triptófano 10.5.5. Producción de amoniaco a partir de la peptona o de la arginina 10.5.6. Producción de ácido sulfhídrico 10.5.7. Producción de amoniaco a partir de urea 10.5.8. Reducción del nitrato 10.6. Pruebas relacionadas con los carbohidratos y otros compuestos carbonados 10.6.1. Hidrólisis de almidón 10.6.2. Producción de ácidos a partir de azúcares, glucósidos y alcoholes polihidroxílicos 10.6.3. Diferenciación entre la oxidación y fermentación de carbohidratos 10.6.4. Producción de dióxido de carbono a partir de glucosa 10.6.5. Prueba del rojo de metilo 10.6.6. Prueba de Voges?Proskauer 10.6.7. Utilización del citrato como única fuente de carbono 10.6.8. Producción de polisacárido a partir de sacarosa 10.6.9. Acción de la leche tornasolada 10.7. Pruebas relacionadas con los lípidos 10.7.1. Hidrólisis de la tributirina 10.7.2. Lipólisis 10.7.3. Hidrólisis de los compuestos del Tween 10.7.4. Hidrólisis de la lecitina 10.8. Otras pruebas bioquímicas 10.8.1. Prueba de la catalasa 10.8.2. Prueba de la oxidasa 10.8.3. Prueba de la coagulasa 10.8.4. Prueba de la fosfatasa 10.8.5. Hemólisis de sangre 10.8.6. Prueba de la potasa 10.8.7. Prueba de motilidad 10.9. Métodos serológicos 10.9.1. Aglutinación 10.9.2. Fijación del complemento 10.9.3. Técnicas de precipitación en gel 10.9.4. ELISA 10.9.5. Seroinhibición 10.10. Técnicas genéticas 10.11. Galerías comerciales 10.11.1. API 10.11.2. BBL 10.12. Antibiograma 10.12.1. Dilución en caldo 10.12.2. Difusión en discos de agar 10.12.3. E-Test 10.13. Pruebas directas Resumen Práctica n.º 9 Actividades de autoevaluación 11. RECUENTO DE MICROORGANISMOS Objetivos Mapa conceptual Glosario 11.1. Técnicas de recuento 11.2. Determinación del número de bacterias viables en una muestra 11.2.1. Método de recuento de colonias 11.2.2. Filtración a través de membrana 11.2.3. Recuento por dilución en tubos 11.2.4. Métodos de reducción del colorante 11.3. Determinación del número total de bacterias de una muestra 11.3.1. Método de extensión de Breed 11.3.2. Recuento directo al microscopio por filtración en membrana 11.3.3. Métodos turbidimétricos 11.3.4. Cámara de recuento 11.4. Recuento en medio sólido 11.4.1. Técnicas usuales 11.4.2. Etapas para recuento estándar 11.4.3. Recuento 11.4.4. Métodos estadísticos para la selección y análisis de colonias 11.5. Recuento en medio líquido 11.5.1. Etapas 11.5.2. Recuento 11.5.3. Tabla 11.5.4. Cálculos 11.6. Sistemas comerciales 11.7. Técnicas instrumentales 11.7.1. Requisitos de la técnicas instrumentales 11.7.2. Sistemas automatizados 11.7.3. Técnicas instrumentales Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 10 Actividades de autoevaluación 12. MICROORGANISMOS INDICADORES Y PATÓGENOS Objetivos Mapa conceptual Glosario 12.1. Microorganismos indicadores 12.2. Características que deben reunir los indicadores fecales 12.3. Microorganismos indicadores, patógenos y toxigénicos de estudio frecuente 12.4. Aerobios mesófilos totales 12.4.1. Valor indicativo 12.4.2. Recuentos 12.5. Coliformes totales 12.5.1. Valor indicativo 12.5.2. Recuento 12.6. Coliformes fecales 12.6.1. Valor indicativo 12.6.2. Detección 12.6.3. Recuento 12.7. Escherichia coli 12.7.1. Valor indicativo 12.7.2. Detección 12.7.3. Recuento 12.7.4. Confirmación general 12.7.5. Confirmación absoluta 12.8. Enterobacteriaceae 12.8.1. Valor indicativo 12.8.2. Preenriquecimiento 12.8.3. Enriquecimiento 12.8.4. Detección 12.8.5. Recuento 12.8.6. Confirmación 12.9. Estreptococos fecales 12.9.1. Valor indicativo 12.9.2. Detección 12.9.3. Recuento 12.9.4. Confirmación 12.10. Clostridium sulfitorreductores 12.10.1. Valor indicativo 12.10.2. Detección 12.10.3. Recuento 12.11. Pseudomonas aeruginosa 12.11.1. Valor indicativo 12.11.2. Enriquecimiento 12.11.3. Detección y recuento 12.11.4. Pruebas bioquímicas 12.12. Salmonella 12.12.1. Preenriquecimiento 12.12.2. Enriquecimiento 12.12.3. Aislamiento 12.12.4. Confirmación bioquímica 12.12.5. Confirmación serológica 12.13. Shigella 12.13.1. Enriquecimiento 12.13.2. Aislamiento 12.13.3. Confirmación bioquímica 12.13.4. Confirmación serológica 12.14. E. coli patógeno 12.14.1. Conservación de muestras 12.14.2. Preenriquecimiento 12.14.3. Enriquecimiento 12.14.4. Aislamiento 12.14.5. Pruebas bioquímicas 12.14.6. Confirmación serológica 12.15. Staphylococcus aureus 12.15.1. Enriquecimiento 12.15.2. Aislamiento-identificación 12.15.3. Recuento 12.15.4. Confirmación bioquímica 12.16. Listeria monocytogenes 12.16.1. Preenriquecimiento 12.16.2. Enriquecimiento 12.16.3. Aislamiento 12.16.4. Confirmación 12.17. Estudio de microorganismos patógenos de investigación menos frecuente 12.17.1. Bacillus cereus 12.17.2. Clostridium perfringes 12.17.3. Clostridium botulinum 12.17.4. Vibrio parahaemolyticus 12.17.5. Vibrio cholerae 12.17.6. Yersinia enterocolítica 12.17.7. Campylobacter 12.17.8. Mohos y levaduras 12.17.9. Chronobacter spp. Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 11 Práctica n.º 12 Práctica n.º 13 Práctica n.º 14 Práctica n.º 15 Práctica n.º 16 Actividades de autoevaluación 13. CONTROL DE SUPERFICIES, DEL AIRE Y DEL SUELO Objetivos Mapa conceptual Glosario 13.1. Control microbiológico ambiental 13.2. Control de superficies 13.2.1. Examen de instalaciones 13.2.2. Examen de equipos 13.2.3. Examen de recipientes 13.3. Sistemas comerciales 13.3.1. Placas Contact Plate 13.3.2. Placas Count?Tact 13.3.3. Probetas Easicult 13.3.4. Placas Petrifilm 13.3.5. Swab Test Kit 13.3.6. Hy food test 13.3.7. Desinfectest 13.4. Microorganismos estudiados 13.5. Evaluación del grado de contaminación superficial 13.6. Control de los manipuladores de alimentos 13.7. Control del aire 13.8. Métodos de control del aire 13.8.1. Análisis por sedimentación 13.8.2. Análisis por filtración 13.8.3. Análisis por muestreo por impacto 13.8.4. Análisis por choque en líquidos 13.8.5. Análisis por precipitación electrostática 13.9. Evaluación del grado de contaminación del aire 13.10. El aire acondicionado 13.11. Patologías y microorganismos 13.12. El suelo como medio 13.12.1. La rizosfera 13.12.2. Los microorganismos en la actividad biogeoquímica 13.12.3. Biodegradación 13.12.4. Biorremediación 13.14.5. Biotoxicidad 13.13. Examen microbiológico del suelo Resumen Ejercicios propuestos Práctica n.º 17 Práctica n.º 18 Actividades de autoevaluación 14. CONTROL DEL AGUA Objetivos Mapa conceptual Glosario 14.1. Medios hídricos 14.1.1. Medios de agua dulce 14.1.2. Medios marinos 14.2. Agua potable 14.3. Desinfección del agua potable 14.4. Factores que afectan a la cantidad y a las clases de microorganismos presentes en las aguas naturales 14.5. Microorganismos acuáticos 14.5.1. Medios de agua dulce 14.5.2. Medios marinos 14.6. Toma de muestras acuosas 14.7. Análisis bacteriológico del agua 14.8. Legislación 14.9. Toma de muestras de aguas 14.10. Aguas de consumo 14.10.1. Aguas de consumo humano 14.10.2. Aguas naturales envasadas 14.10.3. Aguas preparadas envasadas 14.11. Aguas de baño 14.11.1. Agua continental 14.11.2. Aguas costera y de transición 14.10.3. Piscinas de uso colectivo Resumen Práctica propuesta Ejercicios propuestos Práctica n.º 19 Actividades de autoevaluación 15. CONTROL DE LOS ALIMENTOS Objetivos Mapa conceptual Glosario 15.1. Generalidades 15.2. Los alimentos como medios de cultivo 15.3. Conservación de los alimentos 15.4. Microorganismos implicados 15.5. Muestreo y preparación de la muestra de los alimentos 15.6. Análisis bacteriológicos de los alimentos 15.7. Antigua legislación 15.8. Legislación actualizada 15.8.1. Legislación mundial 15.8.2. Legislación europea 15.8.3. Legislación española 15.9. Definiciones 15.10. Criterios microbiológicos para los productos de consumo 15.11. Criterios de seguridad alimentaria para la carne picada 15.12. Criterios de higiene de los procesos para la carne picada 15.13. Muestreo y preparación de la muestra para la carne picada Resumen Práctica propuesta Ejercicios propuestos Práctica n.º 20 Actividades de autoevaluación ANEXO PRÁCTICAS Reactivos para microbiología: pruebas bioquímicas Reactivos para microbiología: desinfectantes Medios de cultivo y afines para microbiología Medios de cultivo deshidratados: agares Medios de cultivo deshidratados: caldos Medios de cultivo: filtración en membrana Desarrollos en placas de Petri Desarrollos en placas Filtración en membrana BIBLIOGRAFÍA